Hybridoma Fusion And Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

产品信息 Opis proizvoda

产品名称

Naziv proizvoda

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Hybridoma Fusion and Selection Medium (HAT)

货号 Kat.br

BRS-MED01

规格

Specifikacija

500ml/瓶

500 mL / boca

产品组分

Komponente

DMEM 基础培养基:80% (体积比)

DMEM osnovni medij: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Uvezeni fetalni goveđi serum (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionirani medij: 10% (v/v)

青霉素:100 单位/mL

Penicilin: 100 U/mL

链霉素:100 单位/mL

Streptomicin: 100 U/mL

次黄嘌呤(Hypoxanthine):100uM

Hipoksantin: 100 µM

胸腺嘧啶核苷(timidin):16uM

Timidin: 16 µM

氨基蝶呤(Aminopterin):0.4uM

Aminopterin: 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Ostali aditivi: Razni citokini (dovoljna količina) i suplementi

保存条件

Uslovi skladištenja

-20 stupnjeva 保存, 有效期 18 个月.

Čuvati na -20 stepeni. Rok trajanja: 18 mjeseci.

使用方法

Uputstvo za upotrebu

培养基融化:

37 stupnjeva 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Odmrzavanje medija:

Odmrznite medijum u vodenom kupatilu na 37 stepeni. Obrišite vanjsku površinu sa 70% etanolom i stavite je u biološki sigurnosni ormarić za upotrebu.
Napomena: Pojava male količine bijelog flokulantnog materijala nakon odmrzavanja je normalna. Ostavite medijum da odstoji 3-5 minuta kako bi se grudvice slegle na dno, a zatim pažljivo sakupite supernatant za upotrebu.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔) (推荐:200ul/孔) 37 stepeni 5% CO2 培养箱静置培养.

Stanična fuzija i sjeme:

Izvršite fuziju ćelija koristeći fizičke (elektrofuzija) ili hemijske (konvencionalne PEG) metode. Resuspendirajte spojene ćelije direktno u ovom mediju u odgovarajućoj gustini i zapremini:

Elektrofuzija: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ ćelije/jažicu

PEG fuzija: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ ćelija/jažicu
Preporučena zapremina: 200 µL/bažici u ploči sa 96 jažica.
Inkubirajte na 37 stepeni, 5% CO₂ za kulturu.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Srednja zamjena:

Dana 4-8 nakon-fuzije, izvršite djelomičnu ili potpunu zamjenu medijuma u skladu sa statusom rasta ćelija.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

kloniranje:

Kada klonovi ćelija u jamicama dostignu odgovarajuću veličinu, izvršite pozitivan klonski skrining.

注意事项

Mjere predostrožnosti

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Ovaj proizvod je toksičan i namijenjen je samo za selekciju i kulturu hibridomskih stanica. Ne smije se koristiti za uzgoj živih životinja, u dijagnostičke svrhe ili u terapijske svrhe.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK HGPRT 缺陷细胞 (NS1, SP2/0).

Ovaj proizvod je pogodan za selekciju i kulturu ćelija hibridoma koristeći HGPRT sistem selekcije. Nije primjenjiv za TK ili druge sisteme selekcije. Ovaj medij se ne može koristiti za direktnu kulturu ćelija s nedostatkom HGPRT-(npr. NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Ovaj proizvod je sterilna otopina s pH 7,2-7,4. Sva rukovanja moraju se obavljati u aseptičnim uslovima.