РНК интерференцияһы (RNAi) скринингы молекуляр биология өлкәһендә ҡөҙрәтле ҡорал булып барлыҡҡа килде, тикшеренүселәргә төрлө күҙәнәк процестары, шул иҫәптән күҙәнәктәрҙең йәшәүе өсөн мөһим гендарҙы системалы билдәләргә мөмкинлек бирә. 213 күҙәнәктәр контексында нейрофән һәм яман шеште тикшергәндә киң ҡулланылған күҙәнәк һыҙығы, уларҙы йәшәүҙә ҡатнашҡан гендарҙы аңлау күҙәнәктәрҙең йәшәүсәнлегенең нигеҙендә ятҡан механизмдарҙы асыу һәм маҡсатлы терапиялар үҫешә. 213 күҙәнәктәр менән тәьмин итеүсе булараҡ, беҙ был күҙәнәктәр буйынса тикшеренеүҙе еңеләйтеүгә һәм уларҙы биологияһы тураһында ҡиммәтле төшөнсәләр бирәбеҙ.
Теттың әһәмиәте - 213 Күҙәнәктәре
213 күҙәнәктәр кеше нейробластомаһынан алынған һәм улар нейрон үҙенсәлектәре һәм дифференциациялау һәләте арҡаһында тикшеренеүҙәрҙә киң ҡулланыла. Был күҙәнәктәрҙе нейрондар үҫешенең, функцияһын һәм ауырыуының төрлө аспекттарын өйрәнеү өсөн ҡулланырға мөмкин, мәҫәлән, нейродегенератив боҙолоуҙар һәм яман шеш. 213 күҙәнәктәрҙең йәшәүендә ҡатнашҡан гендарҙы асыҡлап, тикшеренүселәр күҙәнәктәрҙең йәшәүсәнлеген көйләүсе молекуляр юлдарҙы яҡшыраҡ аңлай ала, был нейробластома һәм башҡа бәйле ауырыуҙарҙы яңы дауалау ысулдарын эшләүгә килтерергә мөмкин.
RNAi скрининг: Ҡөҙрәтле алым
RNAi скринингы бәләкәй ҡамасаулаусы РНК-ларҙы (siRNAs) ҡулланыуҙы үҙ эсенә ала, айырым гендар экспрессияһын юғары - үткәреүсәнлектә махсус рәүештә тын ҡалдырырға. Күҙәнәктәргә сиРНК китапханаһын индереп, күҙәнәктәрҙең йәшәүенә йоғонто яһауҙы күҙәтеп, тикшеренүселәр нокаут күҙәнәктәрҙең йәшәүгә һәләтлелегенең кәмеүенә килтергән гендарҙы асыҡлай ала. Был алым төрлө күҙәнәк һыҙыҡтарына уңышлы ҡулланыла һәм мөһим күҙәнәк процестарында ҡатнашҡан күп гендарҙы асыуға килтергән.
213-сө һанлы күҙәнәктәрҙең йәшәүе
213 күҙәнәк йәшәүе өсөн типик RNAi скрининг тәжрибәһендә күҙәнәктәргә комплекслы сиРНК китапханаһы трансфекциялана. Китапханала меңләгән гендарға йүнәлтелгән сиРНК-лар бар, был геномға - киң анализ мөмкинлеге бирә. Трансфекциянан һуң күҙәнәктәр махсус осорҙа үҫтерелә, ә күҙәнәктәрҙең йәшәүсәнлеге төрлө анализдар ярҙамында үлсәнә, мәҫәлән, МТТ анализы йәки CellTiter - Glo анализы. 1990 йылдарҙа был гендар күҙәнәктәрҙең йәшәүсәнлегенең һиҙелерлек кәмеүенә килтерә, артабан өйрәнеү өсөн потенциаль кандидаттар тип иҫәпләнә.
Кандидат гендары асыҡланғас, уларҙы өҫтәмә эксперименталь ысулдар ҡулланып раҫларға мөмкин. Мәҫәлән, кандидат гендарының нокаутын мРНК кимәленең кәмеүен үлсәү өсөн миҡдарлы реаль-ваҡыт ПЦР (qRT - ПЦР) ярҙамында раҫларға мөмкин. Өҫтәүенә, ген нокаутының күҙәнәк морфологияһына һәм башҡа күҙәнәк функцияларына тәьҫирен микроскопия һәм башҡа биохимик анализдар ярҙамында тикшерергә мөмкин.
213-сө һанлы күҙәнәктәрҙең йәшәүе
Тет - 213 күҙәнәктәрҙең йәшәүендә бер нисә класлы гендар ҡатнашырға мөмкин. Бер класс — апоптозда ҡатнашҡан гендар, программаланған күҙәнәк үлем юлы. Ғаилә 2 ғаилә ағзаһы кеүек гендар, улар апоптоздың митохондрия юлын көйләй, 213 күҙәнәк йәшәүсәнлеген һаҡлауҙа мөһим роль уйнай ала. Тағы бер класс — күҙәнәк циклын көйләүҙә ҡатнашҡан гендар. Күҙәнәк циклының дисрегуляцияһы күҙәнәк үлеменә килтерергә мөмкин, ә циклиндар һәм циклин кеүек гендар - бәйле киназалар Тет өсөн мөһим булыуы мөмкин - 213 күҙәнәк йәшәүе.
Бынан тыш, сигнал трансдукция юлдарында ҡатнашҡан гендар, мәҫәлән, PI3K/Akt юлы һәм МАПК юлы, шулай уҡ Tet - 213 күҙәнәк йәшәүе өсөн мөһим булыуы мөмкин. Был юлдар күҙәнәктәрҙең үҫешен, пролиферацияһын һәм төрлө күҙәнәктән тыш сигналдарға яуап итеп йәшәүҙе көйләүҙә ҡатнаша.
Тикшеренеүҙең һәм терапия өсөн эҙемтәләр
213 күҙәнәктәрҙең йәшәүендә ҡатнашҡан гендарҙы асыҡлау тикшеренеүҙең һәм терапия өсөн бер нисә эҙемтәләргә килтерә. Тикшеренеүҙең был гендары күҙәнәктәрҙең йәшәүсәнлеге һәм сирҙең прогрессив үҫеш механизмдарын аңлау өсөн артабанғы тикшеренеүҙең молекуляр маҡсаттары булып хеҙмәт итә ала. Мәҫәлән, был гендар функцияһын өйрәнеп, тикшеренүселәр нейробластома һәм башҡа бәйле ауырыуҙарҙа дисрегулированный сигнал юлдары тураһында төшөнсә ала ала.
Терапевтикала асыҡланған гендар яңы препараттар эшләү өсөн потенциаль маҡсаттар була ала. Был гендарға йүнәлтелгән рәүештә, нормаль күҙәнәктәрҙе йәлләгәндә яман шеш күҙәнәктәрендә күҙәнәк үлеменә һайлап индуцировать мөмкин. Мәҫәлән, анти-апоптоз гендарының эшмәкәрлеген тотҡарлаусы йәки апоптоз гендарын әүҙемләштереүсе препараттар нейробластома дауалауҙа һөҙөмтәле булыуы мөмкин.
Беҙҙең роле - тет - 213 тәьмин итеүсе
213 күҙәнәктәр менән тәьмин итеүсе булараҡ, беҙ юғары сифатлы күҙәнәктәрҙе һәм тикшеренүселәргә ярҙам итеүгә ынтылабыҙ. Беҙ тәҡдим итәбеҙ, киң спектр Тет - 213 күҙәнәк продукттары, шул иҫәптән күҙәнәктәр төрлө үткәреү һәм культура шарттарында, тикшеренүселәрҙең төрлө ихтыяждарын ҡәнәғәтләндерер өсөн. Күҙәнәктәр менән тәьмин итеүҙән тыш, беҙ шулай уҡ техник ярҙам һәм ресурстар тәҡдим итә, тикшеренүселәргә ярҙам итеү өсөн, уларҙы оптималь тәжрибә.
Беҙ аңлайбыҙ, мөһимлеген RNAi скрининг өйрәнеүҙә Tet - 213 күҙәнәк йәшәү, һәм беҙ даими эшләйбеҙ, беҙҙең продукция һәм хеҙмәттәр яҡшыртыу өсөн яҡшыраҡ ярҙам был төр тикшеренеүҙе. Мәҫәлән, беҙ RNAi скрининг тәжрибәләре ваҡытында 213 күҙәнәктәр өсөн иң яҡшы культура шарттары, шулай уҡ сиРНК трансфекция протоколдары буйынса тәҡдимдәр бирә алабыҙ.
Тикшеренеүҙең менән бәйле пептидтар
213 күҙәнәктәрҙе тәьмин итеүҙән тыш, беҙ шулай уҡ төрлө пептидтар тәҡдим итәбеҙ, улар Тет - 213 күҙәнәк йәшәүе буйынса тикшеренеүҙең актуаль булыуы мөмкин. Мәҫәлән,Паратиреоид гормоны (ПТР) (1 - 34), Кеше- был пептид, тип күрһәтелгән төрлө биологик эшмәкәрлек, шул иҫәптән күҙәнәктәрҙең үҫешенә һәм йәшәүгә йоғонтоһо. Тағы бер пептид,ВИП-ҡа препро (156 - 170) (кеше), шулай уҡ күҙәнәк функцияһын һәм йәшәүен көйләүҙә роль уйнай ала. Өҫтәүенә,Дота - [c [RGDFK)2].- был пептид, уларҙы маҡсатлы препараттар тапшырыу һәм һүрәтләү тикшеренеүҙәрендә ҡулланырға мөмкин, был өйрәнеү контексында файҙалы булыуы мөмкин Тет - 213 күҙәнәк йәшәү һәм яман шеш терапияһы.
Беҙҙең менән бәйләнешкә инеү өсөн һатып алыуҙар һәм хеҙмәттәшлек
Әгәр һеҙ һатып алыу менән ҡыҙыҡһына Tet - 213 күҙәнәктәр йәки беҙҙең ниндәй ҙә булһа бәйле продукция, йәки әгәр һеҙ ниндәй ҙә булһа һорауҙар тураһында RNAi скрининг йәки тикшеренеүҙең Tet - 213 күҙәнәк йәшәү, зинһар, беҙҙең менән бәйләнешкә инергә тартынмағыҙ. Беҙ бында һеҙҙең тикшеренеүҙе раҫлау өсөн һәм һеҙҙең менән хеҙмәттәшлек итеү өсөн көтөп алға аңлау Тет - 213 күҙәнәк биологияһы һәм яңы дауалау стратегияларын эшләү.
Һылтанмалар
- Ханнон Гж. РНК ҡамасаулау. Тәбиғәт. 2002; 418 (6894): 244 - 251.
- Эльбашир С.М., Харборт Дж., Лендекель У., һ.б. - нуклеотид РНК-ларының дуплекстары культуралы һөтимәрҙәр күҙәнәктәренә РНК интерференцияһын медиациялай. Тәбиғәт. 2001;411(6836):494 - 498.
- Эван Г.И., Вусден К.Х. Яман шештә пролиферация, күҙәнәк циклы һәм апоптоз. Тәбиғәт. 2001;411(6835):342 - 348.
- Ашкенази А, Диксит В.М. Апоптоз үлем һәм ҡармаҡ рецепторҙары ярҙамында контролде. Курр Опин күҙәнәк Биол. 1998;10(2):255 - 260.