U oblasti biološkog istraživanja, TET - 213 ćelijska linija pojavila se kao značajan model za različite eksperimentalne istrage, posebno u studijama vezanim za neuroznanost i onkologiju. Kao vodeći dobavljač TET - 213 ćelija, razumijemo važnost odabira odgovarajućih reagenata za transfekciju za efikasno dostavu gena u ove ćelije. Ovaj post bloga ima za cilj istražiti reagense za transfekcije koji su pogodni za TET - 213 i pružaju uvid u svoje prednosti i ograničenja.
Razumijevanje TET - 213 ćelija
Tet - 213 je ljudska neuronalna stanica koja se obično koristi u istraživanju zbog svoje sposobnosti da se razlikuje u neuron - poput ćelija. Ove ćelije su izvedene iz neuroblastoma tumora i zadržavaju mnoge karakteristike ćelija od neuronalnih praznika. Njihova jedinstvena svojstva čine ih vrijednim za proučavanje neuronskog razvoja, funkcije i patogeneze neuroloških bolesti. Transeging egzogeni geni u TET - 213 ćelije mogu pomoći istraživačima da razumiju funkciju gena, regulatorne mehanizme i efekte specifičnih proteina na ćelijske procese.
Ključna razmatranja za transfekciju u Tet - 213 ćelija
Prije odabira reagensa za transfekciju potrebno je uzeti u obzir nekoliko faktora. Prvo, efikasnost transfekcije je presudna. Visoka - Prekinjenje efikasnosti osigurava da veliki udio ćelija zauzima egzogenu DNK ili RNA, omogućavajući robustan izraz ciljanog gena. Drugo, održivost ćelije moraju se održavati nakon prepiska. Neke reagense za transfekcije mogu biti otrovne za stanice, što dovodi do ćelijske smrti ili nenormalnog staničnog ponašanja. Treće, vrsta je nukleinske kiseline koja se preziva (DNK, RNA ili oligonukleotidi) i njenu veličinu može uticati i na izbor reagensa prepiranja.
Reagensi za transfekciju pogodni za Tet - 213 ćelije
Reagensi za prepisnike na bazi lipida
Reagensi za prepisnike na bazi lipida jedna su od najčešće korištenih vrsta agenata za transfekciju. Rade formiranjem liposoma koji ubrajaju nukleinu kiselinu i osigurač sa ćelijom membranom, omogućavajući nukleinu kiselinu da uđe u ćeliju. Lipofectamine 2000 je dobro - poznati lipidni reagens zasnovan - navodno se široko koristi za transfekciju Tet - 213 ćelije. Nudi visoku efikasnost transfekcije, relativno nisku toksičnost i pogodna je za prepisivanje i DNK i RNA.
Mehanizam Lipofectamine 2000 uključuje formiranje pozitivno nabijenih liposoma koji komuniciraju s negativno nabijenim nukleinom kiselinom za oblikovanje lipopleksije. Ovi lipopleksi su zatim internalizirani ćelije kroz endocitozu. Jednom u ćeliji, nukleinska kiselina pušta se i može se prevoziti u jezgro za genski izraz.
Još jedan REAEGENT LIPID - LIPOFECTINE 3000, takođe je prikazao dobre performanse u transfekciji TET - 213 ćelija. To je poboljšana verzija Lipofectamine 2000, sa poboljšanom efikasnošću pretekcije i smanjenu toksičnost. Lipofectamine 3000 koristi novu formulaciju koja omogućava bolju interakciju sa ćelijom i efikasnijom isporukom nukleinskih kiselina.
Reagensi za prepisnike na bazi polimera
Reagensi za prepisnike na bazi polimera su još jedna opcija za transfekciju Tet - 213 ćelije. Polietilenimin (PEI) je najčešće korišten polimernim reagensom. PEI je kationski polimer koji može kondenzirati nukleinske kiseline u male čestice i promovirati njihov unos ćelija. Izvješteno je da postigne visoku efikasnost transfekcije u TET - 213 ćelija, posebno za DNK transfornjik. Prednost PEI je njezina niska cijena i jednostavnost upotrebe. Međutim, to može biti toksično za stanice u visokim koncentracijama, tako je obavezna optimizacija uvjeti transfekcije.
Jetpei je komercijalni polimer - reagens za prepirke zasnovan na zamišljen koji je dizajniran za minimiziranje toksičnosti uz održavanje velike efikasnosti transfekcije. Uspješno se koristi u transfekciji TET - 213 ćelije, pružajući dobru ravnotežu između efikasnosti transfekcije i održivosti ćelije.
Viralni vektori zasnovani na prenenciji
Virusni vektori također se široko koriste za dostavu gena u tet - 213 ćelije. Vektori Adenovirus poznati su po visokoj efikasnosti i sposobnosti za inficinziranje i nepliciranje ćelija. Oni mogu prevoziti relativno velike količine egzogene DNK i pružaju snažan i održivi genski izraz. Međutim, proizvodnja adenovirus vektora je složenija, a vrijeme - konzumiranje u odnosu na ne-virusne reagense za transfekciju.
Lentivirus vektori su još jedna opcija. Oni mogu integrirati egzogeni DNK u genom host ćelija, što rezultira stabilnim genskim izrazom. Lentivirus vektori pogodni su za dugoročne studije u TET - 213 ćelija, poput generiranja stabilnih ćelijskih linija. Međutim, također zahtijevaju posebno rukovanje zbog njihovih potencijalnih biohizacionalnih rizika.
Upoređujući reagense za transfekcije za TET - 213 ćelije
Kada uspoređujete različite reagense za transfekciju, važno je razmotriti njihove performanse u pogledu efikasnosti transfekcije, održivosti ćelije, jednostavnosti upotrebe i troškova. Reagensi na bazi lipida poput Lipofectamine 2000 i 3000 relativno su jednostavni za upotrebu i imaju veliku efikasnost transfekcije uz prihvatljivu održivost ćelije. Pogodni su za kratkoročne i dugoročne eksperimente. Polimerni reagensi poput Pei i Jetpei su troškovi - efikasni i mogu postići dobru efikasnost transfekcije, ali potrebna je optimizacija toksičnosti. Virusni vektori na bazi virusa nude visokoškolsku dostavu gena i stabilan izraz, ali zahtijevaju više specijalizirane opreme i sigurnosnih mjera opreza.
Primjene prestičenog Tet - 213 ćelija
Jednom uspješno prešao, Tet - 213 ćelije se mogu koristiti u različitim aplikacijama. Na primjer, u studijama funkcije gena mogu se koristiti prestičene ćelije za istraživanje uloge specifičnih gena u razvoju i funkciji neuronskog. Prekomjerno preprečavanje ili kucanje određenog gena, istraživači mogu promatrati promjene u ćelijskoj morfologiji, neurotransMitter puštanju i trajnim putem signala.
U otkriću lijekova, prestičene tet - 213 ćelije mogu se koristiti kao model screening za identifikaciju potencijalnih terapijskih agenata. Na primjer, geni povezani sa neurološkim bolestima mogu se prenositi u ćelije, a zatim se stanice mogu tretirati različitim spojevima za procjenu njihovih efekata na bolest - povezane fenotipove.
Štaviše, TET - 213 ćelije prenosne sa genima kodiranjem fluorescentnih proteina mogu se koristiti za uživo - studije za snimanje mobitela. To omogućava istraživačima da u stvarnom vremenu promatraju dinamične ćelijske procese.
Povezani peptidi za pridružene eksperimente
U nekim eksperimentima koji uključuju prestičene tet - 213 ćelije mogu se koristiti dodatni peptidi. Na primjer,Ciklo (Radfk),Supstanca P (9 - 11), iBeta - Amiloid (1 - 40), čovjekMože se koristiti u studijama vezanim za neuronalnu signalizaciju, peptid - interakcije receptora i neurodegenerativne bolesti. Ovi peptidi mogu pomoći daljnjem razvoju mehanizama koji su u osnovi neuronalne funkcije i razvoju bolesti.
Zaključak
Odabir odgovarajućeg reagensa za transfekciju za TET - 213 ćelije ključno je za uspješnu dostavu gena i naknadne eksperimentalne studije. Polimer - zasnovan na polimeru i virusnim - zasnovani na testenzijskim reagensima imaju svoje prednosti i ograničenja. Istraživači bi trebali pažljivo razmotriti specifične zahtjeve svojih eksperimenata, kao što su efikasnost prenošenja, održivosti ćelije i vrstu nukleinske kiseline koja se preniču, pri odabiru reagensa za transfekciju.
Kao dobavljač TET - 213 ćelija, posvećeni smo pružanju visokog kvaliteta ćelija i ponuditi smjernice o najboljim praksama za kulturu i transfekciju ćelije. Ako ste zainteresirani za kupovinu TET - 213 ćelije za svoje istraživanje ili imate pitanja o reagensima transfekcije i srodnim eksperimentima, slobodno nas kontaktirajte za dodatne informacije i raspravljajte o potencijalnim mogućnostima suradnje.
Reference
- Sambrook, J. i Russell, DW (2001). Molekularna klonizacija: laboratorijski priručnik. Hladna proljetna luka laboratorija.
- Chen, C. i Okayama, H. (1987). Visoka - Transformacija efikasnosti ćelija sisara plazmid DNK. Molekularna i ćelijska biologija, 7 (8), 2745 - 2752.
- Amara, F., Rehem, A. i Galy, A. (2016). Pregled trenutnih metoda prestike i sistema isporuke. Časopis za farmacije i bioallirane nauke, 8 (3), 181 - 187.