Hybridoma Cell Expansion and Subcloning Medium 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Opis proizvoda

产品名称

Naziv proizvoda

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Medij za ekspanziju ćelija hibridoma i subkloniranje

货号 Kat.br

BRS-MED02

规格

Specifikacija

500ml/瓶

500 mL/boca

产品组分

Komponente

DMEM基础培养基:80%(体积比)

DMEM osnovni medij: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Fetalni goveđi serum (FBS, uvoz): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionirani medij: 10% (v/v)

青霉素:100 单位/mL

Penicilin: 100 U/mL

链霉素:100 单位/mL

Streptomicin: 100 U/mL

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Ostali aditivi: faktori proliferacije pojedinačnih-ćelija i dodaci malih molekula

保存条件

Uslovi skladištenja

-20 stupnjeva 保存, 有效期 18 个月.

Čuvati na -20 stepeni, rok trajanja 18 meseci

使用方法

Uputstvo za upotrebu

培养基融化:

37 stupnjeva 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Odmrzavanje medija:

Odmrznite medijum u vodenom kupatilu na 37 stepeni. Obrišite vanjsku površinu sa 70% etanolom i stavite u biološki sigurnosni ormarić za upotrebu.
Napomena: Pojava male količine bijelog flokulantnog materijala nakon odmrzavanja je normalna. Ostavite medijum da odstoji 3-5 minuta da se grudvice slegnu, a zatim sakupite supernatant za upotrebu.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻)微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基.铺

Rukovanje Fusion Wells – Zdrave ćelije:

Za fuzijske jažice sa ćelijama u dobrom stanju (npr. srednje boje normalne ili blago žute, ćelije pod mikroskopom izgledaju zdrave, svijetle i normalne veličine), nježno pipetirajte gore-dolje žutim vrhom pipete. Izbrojite ćelije i ploču na 0,8-1,5 ćelija/jažici u 200 µL medijuma.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Rukovanje fuzijskim bunarima – suboptimalne ćelije:

Za fuzione jažice sa ćelijama u suboptimalnim uslovima (npr. srednja zakiseljena/žuta ili ćelije izgledaju smežurane, tamne pod mikroskopom), dostupne su dve opcije za naknadno subkloniranje:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内, 在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Opcija 1: Prenesite ćelije iz fuzijske jažice u ploču sa 24 jažice koja sadrži 1 mL ovog medijuma. Nakon 2-3 dana ekspanzije, prebrojite ćelije i izvršite subkloniranje na 0,8-1,5 ćelija/jažici u 200 µL medijuma. U ovoj fazi, udvostručavanje ćelija je ograničeno, ali stanje ćelije je dobro, što je čini idealnom za subkloniranje.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养37% CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0.8-1.5cell/孔/200ul培养基);

Pažljivo uklonite supernatant iz jažice za fuziju pomoću žutog vrha pipete i dodajte 200 µL svježeg medija po jažici. Inkubirajte na 37 stepeni, 5% CO₂ 3-4 sata. Zatim uzmite uzorke ćelija, prebrojite i izvršite subkloniranje na 0,8–1,5 ćelija/jažici u 200 µL medijuma.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Napomena: Subkloni kultivisani sa medijumom za ekspanziju ćelija Hybridoma i subkloniranje obično dostižu fazu pogodnu za nizvodno skrining ili analizu 6-8 dana nakon-subkloniranja.